लाइव सेल इमेजिंग के लिए माइक्रोस्कोप की आवश्यकता होती हैयह फोटोटॉक्सिसिटी को कम करता है, सेल व्यवहार्यता बनाए रखता है, और समय के साथ उच्च-रिज़ॉल्यूशन इमेजिंग प्रदान करता है। सामान्य विकल्पों में शामिल हैं:
1। उल्टे प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोप:
वाइडफील्ड माइक्रोस्कोप: पर्यावरण नियंत्रण (तापमान, सीओ,, आर्द्रता) और संवेदनशील कैमरों (जैसे, एससीएमओ) से सुसज्जित। अक्सर लेबल-मुक्त इमेजिंग के लिए चरण-विपरीत या डीआईसी (विभेदक हस्तक्षेप कंट्रास्ट) के साथ जोड़ा जाता है।
स्पिनिंग डिस्क कन्फोकल: पारंपरिक लेजर स्कैनिंग कन्फोकल की तुलना में तेजी से स्कैनिंग के साथ फोटोब्लैचिंग को कम करता है। गतिशील प्रक्रियाओं के लिए आदर्श।
2। प्रकाश शीट प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोपी (LSFM):
केवल फोकल विमान को रोशन करता है, हल्के एक्सपोज़र को कम करता है और दीर्घकालिक इमेजिंग (जैसे, घंटे से लेकर दिन) को सक्षम करता है।
3। दो-फोटॉन माइक्रोस्कोपी:
3 डी संस्कृतियों जैसे मोटे नमूनों के लिए उपयुक्त, गहरे ऊतक पैठ और कम फोटोटॉक्सिसिटी के लिए निकट-अवरक्त प्रकाश का उपयोग करता है।
4। TIRF (कुल आंतरिक प्रतिबिंब प्रतिदीप्ति):
पर घटनाओं की कल्पना करता हैकोशिका झिल्ली(जैसे, पुटिका तस्करी) एक पतली (~ 100 एनएम) ऑप्टिकल अनुभाग की इमेजिंग करके।
5। सुपर-रिज़ॉल्यूशन माइक्रोस्कोप (जैसे, स्टेड, सिम):
उच्च रिज़ॉल्यूशन प्राप्त करें लेकिन प्रकाश जोखिम और सेल स्वास्थ्य को संतुलित करने के लिए सावधानीपूर्वक अनुकूलन की आवश्यकता होती है।
6। लाइव-सेल-अनुकूलित सिस्टम:
पर्यावरण कक्षों, अनुकूली प्रकाशिकी और कम-प्रकाश डिटेक्टर (जैसे, ईएम-सीसीडी कैमरा) को शामिल करें।
लाइव इमेजिंग के लिए प्रमुख विशेषताएं:
- पर्यावरण नियंत्रण: तापमान, CO₂, और आर्द्रता बनाए रखता है।
- फास्ट अधिग्रहण: गतिशील प्रक्रियाओं के लिए गति धब्बा को कम करता है।
- कम फोटोटॉक्सिसिटी: फिल्टर, एलईडी लाइट सोर्स, या लाइट शीट रोशनी नुकसान को कम करती है।
रिज़ॉल्यूशन की जरूरतों, इमेजिंग अवधि और नमूना संवेदनशीलता के आधार पर चुनें।
